En el campo de la producción de anticuerpos para su diagnóstico, investigadores del Instituto de Virología de la Universidad El Bosque, crearon una alternativa al producir un anticuerpo antirrábico de gallina.

Actualmente existe una gran dificultad en el diagnóstico de esta enfermedad en Colombia, ya que se dejó de producir en el país el anticuerpo usado para tal fin, por lo cual debe ser importado.

Según Jaime Castellanos, director del Instituto de Virología, “esta es una valiosa herramienta ya que cuando hay una sospecha de exposición al virus, se debe hacer un diagnóstico del animal mordedor, utilizando anticuerpos específicos. Por tal razón, pensamos que era necesario tener en el país una alternativa fácil y confiable con la producción de un anticuerpo antirrábico de gallina como herramienta en el diagnóstico”.

Los anticuerpos de diagnóstico utilizados normalmente son de conejos, a los cuales se les inyecta el virus inactivado, para que no produzca infección y el animal desarrolla una gran cantidad de anticuerpos. Para conseguirlos es necesario realizar la eutanasia para extraer el material de la sangre.

La novedad en el caso de la gallina es que después de 30 días de inocularla con el virus inactivado, ésta empieza a producir los anticuerpos que son transferidos a los huevos, con los cuales se trabaja. Los huevos son recuperados y empieza un proceso de separación de las yemas, para luego retirarle las grasas y dejar las proteínas. En este punto, se realiza una nueva purificación para extraer los anticuerpos de la yema, estas son las inmunoglobulinas aviares, con las cuales finalmente se logra un anticuerpo purificado, que pasa a ser evaluado con las respectivas pruebas de laboratorio y control de calidad. El huevo producido posee la característica de ser hiperinmune gracias a la cantidad de anticuerpo contenido en él.

“La principal ventaja es que la cantidad de anticuerpo recuperado de una yema es equivalente a la extraída de un sólo conejo, por lo tanto se está hablando de tener 20 o 30 huevos al mes, con la misma cantidad de producción de anticuerpos y con la misma calidad y especificidad que los del conejo”, indicó Castellanos.

Tanto en la etapa de consecución del virus, como en la realización de las pruebas preliminares de control de calidad, el grupo de investigación colombiano recibió la colaboración del Laboratorio de Rabia del Instituto Pasteur de Francia. Hasta el momento las pruebas han dado resultados positivos en cerebros de animales infectados y células infectadas, con lo cual se está probando la calidad de este nuevo anticuerpo antirrábico.

De igual forma, investigaciones de otros grupos han encontrado excelentes resultados del anticuerpo de gallina en enfermedades de las encías y en casos donde es administrada por vía oral en el tratamiento de infecciones gastrointestinales en cerdos.

Por su parte, el Instituto Nacional de Salud en el área de parasitología ha tenido éxito en la investigación del anticuerpo en el diagnostico del parásito Giardia duodenalis, que produce diarrea aguda en los niños.

Como indicó el médico parasitólogo Santiago Nichols, miembro de la entidad, “al usar la gallina para este tipo de investigaciones se consigue una mayor producción de anticuerpo por animal lo cual hace el proceso menos traumático”.

El objetivo es poder realizar el diagnóstico del virus en todo animal que muera por encefalitis, el principal síntoma de la rabia, ya que “la detección del virus en muestras de animales o humanos infectados es el primer paso para el control de epidemias y brotes debidos a esta enfermedad”, agregó Castellanos.

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Empollar un huevo hiperinmune

El proceso para conseguir el anticuerpo comienza con la consecución del virus altamente purificado. Para esto se debe producir una gran cantidad del virus, a partir del cultivo de células. Luego de tres días, éstas se infectan y después de 48 horas se extrae el medio de cultivo para una serie de purificaciones bajo distintos métodos, logrando al final un 90 a 95% de pureza.

Luego se realiza la inactivación del virus, la cual es realizada por luz ultravioleta, calor o productos químicos. Para inocular una gallina es necesaria una gran cantidad de proteína viral, lo que requiere mucha producción inicial del virus, pero esto se ve recompensado cuando existe la cantidad suficiente para inocular cuatro o cinco gallinas, ya que hay una gran fuente para la producción de anticuerpos.

Después de la primera inoculación, ésta se repite dos o tres veces antes de los 30 días, para luego recuperar los huevos que conservan los anticuerpos hasta 60 o 90 días después de la primera recuperación. La alternativa que representa el anticuerpo antirrábico de gallina no sólo abre posibilidades en el campo médico.

Como indicó Jaime Castellanos, “el camino ahora es realizar pruebas para demostrar que nuestro anticuerpo se comporta de igual forma que los anticuerpos comerciales, porque en términos económicos ya tiene la ventaja de que su costo es casi 100 veces menor del anticuerpo que normalmente se consigue para diagnostico”.

Igualmente, desde el aspecto ético es posible hablar de una mejora ya que al contrario de lo conejos, no es necesario sacrificar a las gallinas objeto de estudio y los huevos presentan mayor estabilidad al poder preservarse alrededor de un año, lo cual amplia las posibilidades en cuestiones de tiempo, costo y almacenamiento.

Según Nichols, “en estos momentos existe interés en científicos y en la comunidad por hacer más humana la experimentación con animales y en ese camino encontramos nuevas y mejores alternativas”.

{* title=Acerca de la rabia}
Acerca de la rabia:

- Afecta a toda clase de mamíferos, incluido el hombre.
- Se transmite por mordedura o lamedura de animales infectados, como perros y gatos no vacunados.
- En la actualidad, la principal fuente de infección son los murciélagos hematófagos (que se alimentan de sangre).
- La vacuna sólo es efectiva si se administra dentro de las 48 horas después de la mordedura. Pasado ese tiempo el virus entra a los nervios y usando ese medio llega al cerebro, donde se replica y produce una encefalitis, lo que al final lleva a la muerte del paciente.

En Colombia las zonas con mayor presencia del virus son la costa atlántica y la pacífica. En la primera se presenta por la mordedura de zorros salvajes a perros. En la costa pacífica la rabia afecta a bovinos y equinos que pueden transmitir el virus a murciélagos y al hombre.